Кой е най-добрият метод?
—Тестове за диагностика на инфекция със SARS-CoV-2
За потвърдени случаи на COVID-19, съобщените общи клинични симптоми включват треска, кашлица, миалгия или умора.И все пак тези симптоми не са уникални характеристики на COVID-19, тъй като тези симптоми са подобни на тези на друго заразено с вирус заболяване, като грип.Понастоящем PCR в реално време на вирусна нуклеинова киселина (rt-PCR), CT изображения и някои хематологични параметри са основните инструменти за клинична диагностика на инфекцията.Много лабораторни тестови комплекти са разработени и използвани при тестване на проби от пациенти за COVID-19 от китайски CDC1, САЩ CDC2и други частни фирми.Тестът за IgG/IgM антитела, метод за серологично изследване, също е добавен като диагностичен критерий в актуализираната версия на Китай на насоките за диагностика и лечение на новата коронавирусна болест (COVID-19), която беше издадена на 3 март1.Тестът за вирусна нуклеинова киселина rt-PCR все още е настоящият стандартен диагностичен метод за диагностика на COVID-19.
StrongStep®Нов Coronavlrus (SARS-COV-2) Мултиплексен PCR комплект в реално време (откриване за три гена)
И все пак тези PCR тестови комплекти в реално време, търсещи генетичен материал на вируса, например в назални, орални или анални тампони, страдат от много ограничения:
1) Тези тестове имат дълъг период на изпълнение и са сложни при работа;те обикновено отнемат средно от 2 до 3 часа, за да генерират резултати.
2) PCR тестовете изискват сертифицирани лаборатории, скъпо оборудване и обучени техници за работа.
3) Има известен брой фалшиви отрицателни резултати за rt-PCR на COVID-19.Може да се дължи на ниското вирусно натоварване на SARS-CoV-2 в пробата от натривка от горните дихателни пътища (Новият коронавирус заразява главно долните дихателни пътища, като белодробни алвеоли) и тестът не може да идентифицира хора, преминали през инфекция, възстановени и изчистили вируса от телата си.
Изследване на Lirong Zou et al4установи, че по-висок вирусен товар се открива скоро след появата на симптомите, с по-висок вирусен товар, открит в носа, отколкото в гърлото, а моделът на отделяне на вирусна нуклеинова киселина при пациенти, заразени със SARS-CoV-2, наподобява този на пациенти с грип4и изглежда различно от това, наблюдавано при пациенти, заразени със SARS-CoV-2.
Ян Пан и др5изследва серийни проби (натривки от гърло, храчки, урина и изпражнения) от двама пациенти в Пекин и установи, че вирусното натоварване в тампона от гърлото и пробите от храчки достига пик на около 5-6 дни след появата на симптомите, пробите от храчки обикновено показват по-висок вирусен товар от проби от тампон от гърлото.Не беше открита вирусна РНК в проби от урина или изпражнения от тези двама пациенти.
PCR тестът дава положителен резултат само когато вирусът все още присъства.Тестовете не могат да идентифицират хора, преминали през инфекция, възстановили се и изчистили вируса от телата си.Всъщност само около 30% -50% са били положителни за PCR при пациенти с клинично диагностицирана нова коронавирусна пневмония.Много пациенти с нова коронавирусна пневмония не могат да бъдат диагностицирани поради отрицателен тест за нуклеинова киселина, така че не могат да получат съответното лечение навреме.От първото до шестото издание на насоките, разчитайки единствено на диагностицирането на резултатите от теста за нуклеинова киселина, което причини големи проблеми на клиницистите. Най-ранният „разобличител“, д-р Ли Уенлианг, офталмолог в Централния център на Ухан Болница, е мъртъв.По време на живота си той имаше три теста за нуклеинова киселина в случай на треска и кашлица, а последния път получи PCR положителни резултати.
След обсъждане от експерти беше решено да се увеличат серумните методи за изследване като нов диагностичен критерий.Докато тестовете за антитела, наричани още серологични тестове, могат да потвърдят дали някой е бил заразен дори след като имунната му система е изчистила вируса, който причинява COVID-19.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM антитела за бърз тест
Тестът за IgG/IgM антитела ще помогне да се проследи по много по-популационен начин кой е имал инфекцията, тъй като много случаи изглежда се разпространяват от асимптоматични пациенти, които не могат да бъдат идентифицирани лесно.Една двойка в Сингапур, съпругът беше положителен чрез PCR, резултатът от PCR теста на съпругата му беше отрицателен, но резултатите от теста за антитела показаха, че тя има антитела, както и нейният съпруг.
Серологичните анализи трябва да бъдат внимателно валидирани, за да сте сигурни, че реагират надеждно, но само на антитела срещу новия вирус.Едно от опасенията беше, че приликата между вирусите, които причиняват тежък остър респираторен синдром, и COVID-19 може да доведе до кръстосана реактивност.IgG-IgM, разработен от Xue Feng Wang6се счита, че може да се използва като тест на място (POCT), тъй като може да се извърши близо до леглото с кръв от пръст.Комплектът има чувствителност от 88,66% и специфичност от 90,63%.Въпреки това, все още имаше фалшиво положителни и фалшиво отрицателни резултати.
В актуализираната версия на Китай на насоките за диагностика и лечение на новата коронавирусна болест (COVID-19)1, потвърдените случаи се определят като предполагаеми случаи, които отговарят на някой от следните критерии:
(1) Проби от дихателни пътища, проби от кръв или изпражнения, които са положителни за SARS-CoV-2 нуклеинова киселина с помощта на rt-PCR;
(2) Генетичното секвениране на вируса от проби от дихателни пътища, кръв или изпражнения е силно хомоложно с известния SARS-CoV-2;
(3) Серумно ново специфично за коронавирус IgM антитяло и IgG антитяло са положителни;
(4) Серумното ново антитяло, специфично за коронавирус, IgG, променено от отрицателно в положително, или специфично за коронавирус IgG антитяло по време на периода на възстановяване е 4 пъти по-високо от това по време на острия период.
Диагностика и лечение на COVID-19
| Насоки | Публикувано | Потвърдени диагностични критерии |
| Версия 7-ма | 3 март 2020 г | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Версия 6-та | 18 февруари 2020 г | ❶ PCR ❷ NGS |
Справка
1. Насоки за диагностика и лечение на нова коронавирусна пневмония (пробна версия 7, Национална здравна комисия на Китайската народна република, издадена на 3 март 2020 г.)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Изследване Използвайте само RT-PCR протокол в реално време за идентифициране на 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Сингапур твърди, че за първи път използва тест за антитела за проследяване на коронавирусни инфекции
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Вирусен товар на SARS-CoV-2 в проби от горните дихателни пътища на заразени пациенти 19 февруари 2020 г. DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Вирусни натоварвания на SARS-CoV-2 в клинични проби Lancet Infect Dis 2020, публикуван онлайн на 24 февруари 2020 г. (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Разработване и клинично приложение на бърз IgM-IgG комбиниран тест за антитела за SARS-CoV-2
Диагностика на инфекция XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
Време за публикуване: 17 март 2020 г
