Един свят един битка
─ интернационно сътрудничество за изграждане на глобална общност от обща съдба, отговаряща на пандемията на Covid-19
Новият коронавирус, който мете по целия свят, доведе до продължаваща глобална пандемична криза на Covid-19. Романът Coronavirus няма граници, никоя държава няма да бъде пощадена от тази битка срещу Covid-19. В отговор на тази световна пандемия Covid-19, Liming Bio-Products Corp прави принос в подкрепа на благосъстоянието на нашите глобални общности.
В момента нашият свят е изправен пред безпрецедентното въздействие на новата коронавирусна болест 2019 (Covid-19) пандемия. Към днешна дата няма налично ефективно лекарство за лечение на това заболяване. Въпреки това, за откриването на Covid-19 са разработени много диагностични тестове. Тези тестове се основават на молекулярни или серологични методи за откриване на новите биомаркери за специфични нуклеинова киселина или антитела. Тъй като Covid-19 е достигнал пандемичен статус, ранната диагностика на новата коронавирусна инфекция е от решаващо значение при оценката на разпространението на вируса и съдържането му, но все още не съществува перфектен тест за универсална употреба. Трябва да знаем какви тестове потенциално биха могли да се използват за скрининг, диагностика и мониторинг на инфекцията Covid-19 и какви са техните ограничения. Много е важно как да се използва по -добре от тези научни инструменти и да се помогне да се идентифицира и контролира появата на това бързо разпространение и сериозно заболяване.
Целта на откриването на новия коронавирус е да определи дали индивид, който има инфекция с ковада-19, или асимптотичен носител, който може да разпространи вируса безшумно, да предостави съществена информация, за да ръководи вземането на решения за клинично лечение. Предишни проучвания показват, че 70% от клиничните решения зависят от резултатите от тестването. Когато се използват различни методи за откриване, изискванията на комплектите за откриване на реагенти също са различни.
Фигура 1
Фигура 1:Диаграма, показваща ключовите етапи на общите нива на биомаркери по време на типичния времеви курс на инфекция Covid-19. Оста X показва броя на дните на инфекция, а Y-оста показва вирусното натоварване, концентрацията на антигени и концентрацията на антитела в различни периоди. Антитялото се отнася до IgM и IgG антитела. Както RT-PCR, така и откриването на антиген се използват за откриване на наличието или отсъствието на нов коронавирус, което е пряко доказателство за ранно откриване на пациента. В рамките на седмица от вирусна инфекция, PCR откриване или откриване на антиген се предпочита. След новата коронавирусна инфекция в продължение на около 7 дни, IgM антитялото срещу новия коронавирус постепенно се увеличава в кръвта на пациента, но продължителността на съществуването е кратка и концентрацията му намалява бързо. За разлика от тях, IgG антитялото срещу вируса се появява по -късно, обикновено около 14 дни след вирусната инфекция. Концентрацията на IgG постепенно се увеличава и тя продължава дълъг период в кръвта. По този начин, ако IgM се открие в кръвта на пациента, това означава, че вирусът наскоро е заразил, което е маркер за ранна инфекция. Когато в кръвта на пациента се открие IgG антитялото, това означава, че вирусната инфекция е била от известно време. Нарича се още късна инфекция или предишна инфекция. Често се наблюдава при пациенти, които са във фазата на възстановяване.
Биомаркерите на нови коронавирус
Новият коронавирус е вирус на РНК, който е съставен от протеини и нуклеинови киселини. Вирусът нахлува в тялото на гостоприемника (човешкото), влиза в клетките чрез свързващо място, съответстващ рецептор ACE2 и се репликира в клетките на гостоприемника, което води до имунната система на човека да реагира на чужди нашественици и да произвежда специфични антитела. Следователно, флаколните нуклеинови киселини и антигени и специфични антитела срещу нови коронавирус теоретично могат да бъдат използвани като специфични биомаркери за откриване на новия коронавирус. За откриване на нуклеинова киселина RT-PCR технологията е най-често използваната, докато серологичните методи обикновено се използват за откриване на новите коронавирусни специфични антитела. Понастоящем има различни методи за изпитване, които можем да изберем за тестване на инфекция Covid-19 [1].
Основни принципи на основните методи на изпитване за нов коронавирус
Досега са налични много диагностични тестове за covid_19, като повече тестови комплекти получават одобрение при разрешение за спешна употреба всеки ден. Въпреки че новите тестови разработки, излизащи с толкова много различни имена и формати, всички текущи тестове Covid_19 основно разчитат на две основни технологии: откриване на нуклеинова киселина за вирусната РНК и серологичните имуноанализи, които откриват специфични за вируса антитела (IGM и IgG).
01. Откриване на нуклеинова киселина
Обратна транскрипционно-полимеразна верижна реакция (RT-PCR), изотермична амплификация (LAMP), а секвенирането на следващото поколение (NGs) са общите методи на нуклеинова киселина за откриване на нова коронавирусна РНК. RT-PCR е първият тип тест за Covid-19, препоръчан както от Световната здравна организация (СЗО), така и от Центъра за контрол и превенция на заболяванията на САЩ (CDC).
02.Серологично откриване на антитела
Антитялото е защитен протеин, произведен в човешкото тяло в отговор на вирусната инфекция. IgM е ранен тип антитяло, докато IgG е антитяло по -късен тип. Серумната или плазмената проба обикновено се изследва за наличието на специфични IgM и IgG видове на антитялото за оценка на остри и възстановителни фази на инфекция Covid-19. Тези методи на откриване на базата на антитела включват колоидна златна имунохроматография анализ, латекс или флуоресцентна микросферна имунохроматография, имуносорбентен анализ, свързан с ензима (ELISA) и анализ на хемилуминесценция.
03. ЗДРАВЕН АНТИГЕН Откриване
Антигенът е структура на вируса, разпознат от човешкото тяло, който задейства имунната защитна система да произвежда антитела за изчистване на вируса от кръв и тъкани. Вирусен антиген, присъстващ на вируса, може да бъде насочен и открит с помощта на имуноанализ. Подобно на вирусната РНК, вирусните антигени присъстват и в дихателните пътища на заразените индивиди и могат да се използват за диагностициране на остра фаза на инфекцията Covid-19. Следователно, често се препоръчва да се събират екземпляри от горната дихателна дихателна респиратора като слюнка, назофарингеални и орофарингеални тампони, дълбока кашлица, бронхоалвеоларна промивна течност (BALF) за първоначално тестване на антиген.
Избор на методи за тестване за нов коронавирус
Изборът на метод на тестване включва много фактори, включително клинична настройка, контрол на качеството, време за изпълнение, разходи за тестване, методи за събиране на проби, технически изисквания на лабораторния персонал, изисквания за съоръжение и оборудване. Откриването на нуклеинови киселини или вирусни антигени е да се предоставят директни доказателства за наличието на вирусите и да се потвърди диагностицирането на нова коронавирусна инфекция. Въпреки че има много методи за откриване на антиген, тяхната чувствителност към откриване на новия коронавирус е теоретично по-ниска от тази на усилването на RT-PCR. Тестването на антитела е откриването на антивирусни антитела, произведени в човешкото тяло, което изостава във времето и често не може да се използва за ранно откриване по време на острата фаза на вирусна инфекция. Клиничната настройка за приложения за откриване може да варира и местата за събиране на проби също могат да бъдат различни. За откриване на вирусни нуклеинови киселини и антигени, образецът трябва да се събира в дихателните пътища, където вирусът е наличен, като назофарингеални тампони, орофарингеални тампони, храчки или бронхоалвеоларна течност (BALF). За откриване на базата на антитела трябва да се събира и изследва кръвния образец за наличие на специфично антивирусно антитяло (IgM/IgG). Резултатите от теста за антитяло и нуклеинова киселина могат да се допълват взаимно. Например, когато резултатът от тестването е отрицателна от нуклеиновата киселина, IgM-отрицателна, но IgG-положителна, тези резултати показват, че пациентът понастоящем не носи вируса, но е възстановен от новата коронавирусна инфекция. [2]
Предимства и недостатъци на новите тестове на коронавирус
В протокола за диагностика и лечение на нова коронавирусна пневмония (пробна версия 7) (издадена от Националната здравна комисия и държавната администрация на традиционната китайска медицина на 3 март 2020 г.), тестването на нуклеинова киселина се използва като метод на златен стандарт за диагностициране на романа Коронавирусна инфекция, докато тестването на антитела също се счита за един от методите за потвърждение за диагнозата.
Патогенни и серологични находки
(1) Патогенни находки: Новата коронавирусна нуклеинова киселина може да бъде открита в назофарингеални тампони, храчки, секрети на долните дихателни пътища, кръвта, изпражненията и други образци, използващи RT-Pcrand/или NGS методи. По -точно е, ако образците се получат от долните дихателни пътища (храчки или извличане на въздушни пътища). Екземплярите трябва да бъдат изпратени за тестване възможно най -скоро след събиране.
(2) Серологични находки: Специфичният IGM на вируса на NCP става открит около 3-5 дни след началото; IgG достига титруване на най-малко 4-кратно увеличение по време на възстановяване в сравнение с острата фаза.
Изборът на методи за тестване обаче зависи от географските места, медицинските разпоредби и клиничните условия. В САЩ, NIH издаде коронавирусна болест 2019 (Covid-19) Насоки за лечение (Актуализиран сайт: 21 април 2020 г.) и FDA издаде политика за диагностични тестове за коронавирусна болест-2019 г. по време на спешното за обществено здраве (издадена на 16 март 2020 г. ), в които серологично тестване на IgM/IgG антитела, избрани само като скринингов тест.
Метод за откриване на нуклеинова киселина
RT_PCR е силно чувствителен тест за нуклеинова киселина, предназначен да открие дали новата коронавирусна РНК присъства или не в дихателния или друг образец. Резултатът от положителния PCR тест означава наличието на нова коронавирусна РНК в пробата, за да се потвърди инфекцията Covid-19. Отрицателен резултат от PCR тест не означава липсата на вирусна инфекция, тъй като може да бъде повлиян от лошо качество на пробата или времева точка на заболяване в възстановената фаза и т.н. Въпреки че RT-PCR е силно чувствителен тест, той има няколко недостатъка. RT-PCR тестовете могат да бъдат трудоемки и отнемащи време, изключително зависими от високото качество на извадката. Това може да бъде предизвикателство, тъй като количеството на вирусната РНК не само варира изключително много в различните пациенти, но и може да варира в рамките на един и същ пациент в зависимост от времевите точки, когато пробата се събира, както и от фазите на инфекция или началото на клиничните симптоми. Откриването на новия коронавирус изисква висококачествени образци, които съдържат достатъчно количество непокътната вирусна РНК.
Тестът RT-PCR може да даде неправилен отрицателен резултат (фалшив отрицателен) за някои пациенти, които имат инфекция с Covid-19. Както знаем, основните места за инфекция на новия коронавирус са разположени в белия дроб и долния дихателен тракт, като алвеоли и бронхи. Следователно, образецът на храчката от дълбока кашлица или бронхоалвеоларната промивна течност (BALF), за която се смята, че има най -висока чувствителност за откриване на вируса. Въпреки това, в клиничната практика пробите често се събират от горните дихателни пътища чрез използване на назофарингеални или орофарингеални тампони. Събирането на тези екземпляри е не само неудобно за пациентите, но също така изисква специално обучен персонал. За да направят вземането на проби по -малко инвазивно или по -лесно, в някои случаи пациентите могат да получат орален тампон и да им позволят да вземат проба от букалната лигавица или да се сплитат на езика. Без достатъчно вирусна РНК, RT-QPCR може да върне фалшиво-отрицателен резултат от теста. В провинция Хубей, Китай, чувствителността на RT-PCR при първоначалното откриване се отчита само около 30%-50%, със средно 40%. Високият процент на фалшиво отрицателно е най-вероятно причинен от недостатъчно вземане на проби.
В допълнение, RT-PCR тестът изисква високо обучен персонал да извършва сложни етапи на екстракция на РНК и процедура за усилване на PCR. Той също така изисква по-високо ниво на защита на биобезопасността, специална лабораторна съоръжение и PCR инструмент в реално време. В Китай трябва да се извърши тестът RT-PCR за откриване на Covid-19 в лаборатории за биологична безопасност 2 (BSL-2), като защитата на персонала се използва практика на биологична безопасност 3 (BSL-3). Съгласно тези изисквания, от началото на януари до началото на февруари 2020 г., капацитетът на лабораторията на CDC на Китай Wuhan успя да открие само няколкостотин случая на ден. Обикновено това не би било проблем при тестване на други инфекциозни заболявания. Въпреки това, когато се занимава с глобална пандемия като Covid-19 с потенциално милиони хора, които трябва да бъдат тествани, RT-PCR се превръща в критичен проблем поради изискванията си за специални лабораторни съоръжения или техническо оборудване. Тези недостатъци могат да ограничат RT-PCR, който да се използва като ефективен инструмент за скрининг, а също така може да доведе до закъснения в докладите за резултатите от тестването.
Метод за откриване на серологично антитела
С напредъка на болестта, особено в средния и късния етап, степента на откриване на антитела е много висока. Проучване в болницата в Централна Южна Ухан показа, че степента на откриване на антитела може да достигне повече от 90% през третата седмица на инфекцията Covid-19. Също така, антитялото е продукт на човешкия имунен отговор срещу новия коронавирус. Тестът за антитела предлага няколко предимства пред RT-PCR. Първо, серологичното антитяло тества просто и бързо. Тестовете за страничен поток на антитялото могат да се използват за постигане на точката, за да се постигне резултат за 15 минути. Второ, целта, открита от серологичния тест, е антитялото, за което е известно, че е много по -стабилно от вирусната РНК. По време на събиране, транспортиране, съхранение и тестване, образците за тестове за антитела обикновено са по-стабилни от образците за RT-PCR. Трето, тъй като антитялото се разпределя равномерно в кръвообращението, има по -малко изменение на вземането на проби в сравнение с теста за нуклеинова киселина. Обемът на пробата, необходим за теста за антитела, е сравнително малък. Например, 10 микролитър на кръвта на пръст е достатъчен за използване при теста за страничен поток на антитялото.
По принцип тестът за антитела се избира като инструмент за добавка за откриване на нуклеинова киселина за подобряване на степента на откриване на новия коронавирус по време на курсовете за болест. Когато тестът за антитела се използва заедно с тест за нуклеинова киселина, това може да увеличи точността на анализа за диагностицирането на Covid19 чрез намаляване на потенциалните фалшиво-положителни и фалшиво-отрицателни резултати. Настоящото ръководство за работа не препоръчва да използвате два типа тестове отделно като независим формат на откриване, но трябва да се използва като комбиниран формат. [2]
Фигура 2:Правилната интерпретация на резултатите от теста за нуклеинова киселина и антитела за откриване на нова коронавирусна инфекция
Фигура 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Нов коронавирусен IgM/IgG антитела Dual Rapid Test Kit (Strongstep®SARS-COV-2 IgM/IgG антитяло RAPID тест, латекс имунохроматография)
Фигура 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Нов коронавирус (SARS-COV-2) мултиплекс PCR Kit в реално време (откриване за три гена, метод на флуоресцентна сонда).
Забележка:Този силно чувствителен, готов за употреба PCR комплект се предлага в лиофилизиран формат (процес на замразяване) за дългосрочно съхранение. Комплектът може да се транспортира и съхранява при стайна температура и е стабилен за една година. Всяка епруветка на Premix съдържа всички реагенти, необходими за амплификацията на PCR, включително обратен транскриптаза, TAQ полимераза, праймери, сонди и DNTPS субстрати. Потребителят може просто да възстанови сместа, като добави PCR-класната вода заедно с шаблона и след това зареждане върху PCR инструмент за стартиране на усилването.
В отговор на новата коронавирусна огнище, Liming Bio-Products Co., Ltd. работи бързо, за да разработи два диагностични комплекта, за да даде възможност за клинични и обществени лаборатории за бързо диагностициране на инфекция Covid-19. Тези комплекти са много подходящи за използване за мащабен скрининг в страни и региони, където новото коронавирусно огнище бързо се разпространява и за осигуряване на диагноза и потвърждение за инфекция с Covid-19. Тези комплекти са за използване само при предварително нотифицирано разрешение за спешна употреба (PEUA). Тестването е ограничено до лаборатории, сертифицирани съгласно разпоредбите на националните или местните власти.
Метод за откриване на антиген
1. Откриването на вирусен антиген е класифицирано в същата категория на директно откриване като откриване на нуклеинова киселина. Тези методи за директно откриване търсят доказателства за вирусни патогени в образеца и могат да бъдат използвани за диагностициране на потвърждение. Въпреки това, развитието на комплекти за откриване на антиген изисква високо качество на моноклонални антитела със силен афинитет и висока чувствителност, способен да разпознава и улавя патогенни вируси. Обикновено са необходими повече от шест месеца, за да се избере и оптимизира моноклонално антитяло, подходящо за използване при получаването на комплекта за откриване на антиген.
2. Понастоящем реагентите за директно откриване на новия коронавирус все още са в етап на изследване и развитие. Следователно, нито един комплект за откриване на антиген не е клинично валидиран и наличен в търговската мрежа. Въпреки че по -рано беше съобщено, че диагностична фирма в Шенжен е разработила комплект за откриване на антиген и клинично тества в Испания, надеждността и точността на анализа не могат да бъдат валидирани поради наличието на проблеми с качеството на реагентите. Към днешна дата NMPA (бивш China FDA) все още не е одобрил никакъв комплект за откриване на антиген за клинична употреба. В заключение са разработени различни методи за откриване. Всеки метод има своите предимства и ограничения. Резултатите от различни методи могат да се използват за проверка и допълнение.
3. Изготвянето на качествен тестов комплект Covid-19 силно зависи от оптимизацията по време на изследвания и разработки. Liming Bio-Product Co., Ltd Тестовите комплекти са длъжни да отговарят на строгите стандарти за производство и контрол на качеството, за да се гарантира, че те осигуряват най -високите нива на производителност и последователност. Учените от Liming Bio-Product Co., Ltd. имат опит над двадесет години опит в проектирането, тестването и оптимизирането на in vitro диагностични комплекти, за да осигурят най-високото ниво на ефективност при аналитичното количествено определяне.
По време на пандемията Covid-19 китайското правителство се сблъска с скока на огромното търсене на материали за превенция на епидемията в международните горещи точки. На 5 април, на пресконференцията на Механизма на Съвместната превенция и контрол на Държавния съвет, „укрепване на управлението на качеството на медицинските материали и регулиране на реда на пазара“, Jiang Fan, инспектор на първо ниво на Министерството на външната търговия на Министерството на търговията, каза: „След това ще съсредоточим усилията си върху два аспекта, първо, да ускорим подкрепата на повече медицински доставки, необходими на международната общност, а също и за подобряване на контрола на качеството, регулирането и управлението на продуктите. Ще направим приноса на Китай за съвместно реагиране на глобалната епидемия и изграждането на общност с споделено бъдеще за човечеството.
Фигура 5:Liming Bio-Products Co., романът на Ltd. Coronavirus Reagent, получи удостоверението за регистрация на ЕС
Почетният сертификат
Хюшан
Фигура 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. Подкрепена планинска болница Wuhan Vulcan (Houshenshan), за да се бори срещу епидемията от Covid-19 и получи почетен сертификат на Wuhan Red Cross. Wuhan Vulcan Mountain Hospital е най -известната болница в Китай, която е специализирана в лечението на тежки Covid - 19 пациенти.
Тъй като романът Coronavirus Expreed продължава да се разпространява по целия свят, Bio-Products Co., Ltd., Ltd. Бързото тестване на инфекцията Covid-19 е критична част от адресирането на тази заплаха. Продължаваме да допринасяме по важен начин, като предоставяме висококачествени диагностични платформи в ръцете на фронтовите здравни работници, така че хората да получават критичните резултати от тестването, от които се нуждаят. Усилията на Bio-Products на Liming Bio-Products в битката срещу пандемията Covid-19 са да допринесат за нашите технологии, опит и опит в международните общности за изграждането на глобална общност на съдбата.
Дълго натиснете ~ Сканиране и ни следвайте
Имейл: sales@limingbio.com
Уебсайт: https://limingbio.com
Време за публикация: май-01-2020
